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黃曲霉毒素A檢測試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理及檢測方法

發(fā)布時間: 2022-08-11  點(diǎn)擊次數(shù): 753次
   黃曲霉毒素A檢測試劑盒主要是用于玉米、大米、麥類、豆類、花生、花生醬中黃曲霉毒素B1(AFB1)殘留的定量檢測。黃曲霉毒素是一類真菌(如黃曲霉和寄生曲霉)的有毒的代謝產(chǎn)物,它們具有很強(qiáng)的致癌性,主要存在于谷物、堅(jiān)果、棉籽以及一些和人類血液,動物飼料相關(guān)的產(chǎn)品中。
  
  實(shí)驗(yàn)原理:
  黃曲霉毒素A檢測試劑盒采用直接競爭ELISA方法,在微孔板包被有黃曲霉毒素B1(AFB1)偶聯(lián)抗原,加入黃曲霉毒素B1(AFB1)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離黃曲霉毒素B1(AFB1)微孔條上預(yù)包被的黃曲霉毒素B1(AFB1)偶聯(lián)抗原互相競爭抗黃曲霉毒素B1(AFB1)體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長下進(jìn)行檢測,吸光值與樣品中黃曲霉毒素B1(AFB1)含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中黃曲霉毒素B1(AFB1)的含量。
  
  黃曲霉毒素部分檢測方法:
  1、生物傳感法:生物傳感器是使用固定化技術(shù)將具有分子識別能力的生物活性物質(zhì)與物理化學(xué)換能器結(jié)合,可以用來探測生物體內(nèi)外的環(huán)境化學(xué)物質(zhì)或與之起特異性交互作用后產(chǎn)生響應(yīng)的一種裝置。
  2、金標(biāo)試紙法:金標(biāo)試紙法,實(shí)際就是一種固相免疫分析法。
  3、熒光光度法:IAC/SFB法也是一種常用的國標(biāo)方法。該方法的原理是利用各種黃曲霉素的熒光特性差異用熒光光度計(jì)測定試樣中黃曲霉素的含量。
  4、毛細(xì)管電泳法:毛細(xì)管電泳(CE)也是一種新發(fā)展起來的分析黃曲霉素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測器(LIF)連用可很好地提高靈敏度。
  5、酶聯(lián)免疫法(ELISA):ELISA法也是近年來研究開發(fā)出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據(jù)抗體和抗原之間特異性的免疫學(xué)反應(yīng),后用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。
  6、液相色譜法(HPLC):HPLC法是近年來發(fā)展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱后衍生系統(tǒng)分離,再用熒光檢測器測定。
  7、薄層分析法(TLC):TLC法是檢測黃曲霉素為經(jīng)典的方法,也是以前為常用的方法,至今仍為一些檢測機(jī)構(gòu)所用,也是一種國標(biāo)方法。

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