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胰島素ELISA試劑盒的操作流程

發(fā)布時(shí)間: 2023-05-11  點(diǎn)擊次數(shù): 1338次
  胰島素ELISA試劑盒是一種常見(jiàn)的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)工具,用于檢測(cè)血液中的胰島素含量。它作為一種常用的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)工具,具有操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確性高、靈敏度強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),在糖尿病等相關(guān)疾病的診斷和治療中發(fā)揮著重要的作用。
 
  一、原理
 
  ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)試劑盒是基于酶標(biāo)記技術(shù)和免疫學(xué)原理的試劑盒。在胰島素ELISA試劑盒中,首先將包含特異性抗體的固相載體放在微孔板上,然后加入待測(cè)標(biāo)本和酶標(biāo)記的二抗,隨后進(jìn)行洗滌步驟,最后加入底物,觀察反應(yīng)產(chǎn)物的信號(hào)強(qiáng)度,并根據(jù)參比標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出待測(cè)樣品中的胰島素含量。
 
  二、操作流程
 
  1、樣品處理:將待測(cè)血清離心去除懸浮物,得到清澈的上清液。
 
  2、準(zhǔn)備試劑:將試劑盒內(nèi)所需試劑取出并恢復(fù)至室溫。
 
  3、樣品加標(biāo):將待測(cè)標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品依次加入微孔板中,每個(gè)孔添加適量的樣品,注意對(duì)照孔要做好空白對(duì)照。
 
  4、孵育:將微孔板加蓋并在恒溫水浴中孵育,使抗體與樣品中的胰島素結(jié)合。
 
  5、洗滌:用洗滌緩沖液反復(fù)洗滌微孔板,去除未結(jié)合的物質(zhì)。
 
  6、添加酶標(biāo)記的二抗:將酶標(biāo)記的二抗加入每個(gè)孔中,孵育一段時(shí)間后再次洗滌。
 
  7、添加底物:向每個(gè)孔中添加底物,使其和酶標(biāo)記形成顯色產(chǎn)物。
 
  8、終止反應(yīng):在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間內(nèi),加入終止劑停止顯色反應(yīng)。
 
  9、測(cè)量吸光度:利用酶標(biāo)儀檢測(cè)孔內(nèi)顯色產(chǎn)物的吸光度。
 
  三、應(yīng)用
 
  胰島素ELISA試劑盒廣泛用于臨床醫(yī)學(xué)中對(duì)糖尿病患者血液中胰島素含量進(jìn)行定量檢測(cè),也可用于研究中對(duì)胰島素和胰島素類(lèi)似物的測(cè)定。此外,ELISA技術(shù)還可以應(yīng)用于藥物篩選、蛋白質(zhì)相互作用研究等領(lǐng)域。

胰島素ELISA試劑盒

 

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