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如何改進ELISA試劑盒實驗中的錯誤

發(fā)布時間: 2024-09-05  點擊次數: 569次

 ELISA試劑盒有許多實驗操作步驟,新手操作難免出錯。其中許多錯誤是由不充分的細節(jié)造成的。有很多方法可以減少這種錯誤,比如在做實驗時少說話,以防止唾液掉進酶的標簽中。當然,我們也要學會探索自己的問題,找出原因。那么,我們如何改進ELISA試劑盒實驗中的錯誤呢?


  1、評價試劑的實用性

  試劑的穩(wěn)定性對準確度非常重要。在啟用ELISA試劑盒之前,應重復檢測陰性和陽性對照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能使用。

  2、操作前仔細閱讀ELISA試劑盒說明書

  嚴格按照說明書要求進行標準化操作。不同批號的試劑不混合。值得改進的是,只有經過反復的試驗,如洗盤的數量,才能加以改進。

  3、加樣要準確、快速

  樣品添加的不準確度和酶制劑用量的不確定度直接影響顯色效果。此外,顯色深度和A值的確定與顯色劑和最終液體的加入量有關,因此樣品的裝載應謹慎。需要在一定時間內完成采樣的實驗,如果采樣速度慢,會出現誤差,試劑會暴露很長時間,特別是當室溫過高時,保質期會縮短甚至失效。

  4、檢驗技術人員應具備實驗室操作的基本素質和實踐經驗。

  檢測技術人員能夠熟練操作實驗儀器儀表,具有一定的總結和分析問題的能力,能及時、妥善地解決ELISA試劑盒實驗中出現的意外情況。

  5、洗滌要絕對干凈

  洗版不干凈,酶偶聯(lián)物的背景顏色為假陽性。此外,清潔劑應該是新鮮的,可以隨時使用。舊的洗滌劑會增加背景,也可能出現假陽性。

  6、嚴控ELISA試劑盒實驗反應時間

  ELISA試劑盒反應時間過長,酶被滅活,反應時間過短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能全部結合,產物結構松散不穩(wěn)定,易清洗,易產生假陰性。


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