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如何判斷新生牛血清的性能好壞?

發(fā)布時間: 2024-10-14  點(diǎn)擊次數(shù): 190次
  新生牛血清(NewbornCalfSerum,簡稱NBCS)是通過采集出生0-7天或0-30天內(nèi)的新生牛靜脈血,經(jīng)除菌過濾后制成的用于動物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的生物試劑。其質(zhì)量好壞直接影響細(xì)胞的生長情況,因此判斷牛血清的性能至關(guān)重要。
  以下是一些關(guān)鍵指標(biāo)和方法來判斷新生牛血清的性能:
  總蛋白含量
  定義:總蛋白是牛血清中的重要成分,在細(xì)胞培養(yǎng)中起著維持滲透壓、pH值緩沖、物質(zhì)運(yùn)輸和提供營養(yǎng)等作用。
  檢測方法:通過化學(xué)成分分析,測定血清中的總蛋白含量。一般來說,國產(chǎn)牛血清的總蛋白含量在3.7%到4.4%之間。
  評估標(biāo)準(zhǔn):總蛋白含量適中且穩(wěn)定,表明血清質(zhì)量好。如果總蛋白含量過高或過低,可能意味著血清摻假或處理不當(dāng)。
  血紅蛋白含量
  定義:血紅蛋白是評價牛血清生產(chǎn)工藝好壞的重要指標(biāo)。在采血、運(yùn)輸和儲存過程中,紅細(xì)胞可能會裂解釋放出血紅蛋白。
  檢測方法:通常采用分光光度法來測定血紅蛋白含量。
  評估標(biāo)準(zhǔn):優(yōu)質(zhì)的新生牛血清中血紅蛋白含量應(yīng)盡可能低。《中國藥典》三部(2015版)要求血紅蛋白含量不高于200mg/L。血紅蛋白含量高可能導(dǎo)致細(xì)胞受損和下游純化難度增加。
  內(nèi)毒素含量
  定義:內(nèi)毒素是由革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁裂解釋放的毒素,不利于細(xì)胞生長。
  檢測方法:通過定量檢測內(nèi)毒素含量,通常以EU/ml為單位。
  評估標(biāo)準(zhǔn):內(nèi)毒素含量≤10EU/ml為特級,內(nèi)毒素含量>10EU/ml且≤25EU/ml為優(yōu)級,內(nèi)毒素含量≥25EU/ml為標(biāo)準(zhǔn)級。內(nèi)毒素含量越低,對細(xì)胞生長越有利。
  外觀
  顏色:根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色。優(yōu)質(zhì)進(jìn)口血清呈現(xiàn)淡黃或微紅色,而劣質(zhì)血清可能呈現(xiàn)橘紅色或鮮紅色。熱滅活或保存不當(dāng)?shù)难鍟尸F(xiàn)暗紅甚至咖啡色。
  澄清度:進(jìn)口血清由于蛋白和脂類含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡;國產(chǎn)血清相對粘稠,顏色略深。
  沉淀
  觀察:進(jìn)口血清在過濾分裝前很少反復(fù)凍融,成品清澈。但隨著時間推移,血清中的纖維蛋白會析出形成沉淀。
  評估:優(yōu)質(zhì)血清在生產(chǎn)后初期應(yīng)清澈無沉淀,長時間存放后可能會有少量沉淀。
  免疫球蛋白含量
  定義:免疫球蛋白的含量可以反映采血時牛齡情況。胎牛血清不含IgM,IgG含量也較低。
  檢測方法:通過免疫學(xué)方法測定IgG和IgM的含量。
  評估標(biāo)準(zhǔn):IgG含量遠(yuǎn)低于標(biāo)準(zhǔn)值,表明采血時牛齡較小,血清質(zhì)量較好。
  微生物和病毒含量
  定義:微生物包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體及各類病原性病毒,這些微生物會影響血清質(zhì)量。
  檢測方法:通過細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)和多種病毒檢測來評估。
  評估標(biāo)準(zhǔn):出廠前經(jīng)過嚴(yán)格檢測,確保無致病變、無血吸附、多種病毒檢測陰性。
  批間差
  定義:不同批次血清中的微妙成分差異可能導(dǎo)致細(xì)胞適應(yīng)期延長,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
  評估標(biāo)準(zhǔn):通過嚴(yán)格的質(zhì)量控制篩選和驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn),減少批間差異。
 

 

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